Identificarea in vitro a unor markeri moleculari predictivi ai raspunsului la tratamentul cu oxaliplatin in cancerele colorectale. Utilizarea lor pe modele in vivo in cercetarea translationala.

Institutia gazda a proiectului
Director de proiect
Membrii echipei
Perioada de derulare
Valoarea contractului
Finantator
Etape: Anul 2009
Rezultate obtinute

Institutia gazda a proiectului
: Institutul Oncologic “Prof. Dr. I. Chiricuta”Cluj-Napoca, Str. Republicii, nr. 34-36, telefon/fax: 0264-598361/0264-439260

Director de proiect: Dr. Piroska Virag - biolog principal

Membrii echipei: Dr. Ioana Neagoe - chimist principal; Dr. Ovidiu Balacescu - chimist principal; Eva Fischer-Fodor – doctorand, chimist principal; Claudia Burz – doctorand, medic specialist; Loredana Balacescu – doctorand, fizician.

Perioada de derulare: 2009-2011
Valoarea contractului: 1 000 000 lei
Finantator (partea romana): Consiliul National al Cercetarii Stiintifice din Invatamantul Superior (CNCSIS)

Etape: Anul 2009:

Etapa I.
1. Achizitionarea mediilor si a reactivilor necesari inceperii analizelor
1.1. Achizitionarea materialelor necesare liniilor de cancer colorectal (medii de cultura, suplimenti, consumabile)
1.2. Achizitionarea unor kituri necesare evaluarii ciclului celular
2. Studiu in vitro pe linii celulare sensibile si rezistente la Oxaliplatin
2.1. Dezvoltarea unor linii celulare rezistente la Oxaliplatin prin tratarea liniilor celulare sensibile cu doze crescande de Oxaliplatin
2.2. Stabilirea dozei maxime letale de Oxaliplatin (DML) prin testul MTT cu studierea influentei nivelului dozelor administrate

Etapa II.
1. Analizarea ciclului celular si a apoptozei induse de Oxaliplatin pe linii celulare sensibile si rezistente la citostatic
1.1. Evaluarea ciclului celular si a apoptozei induse de Oxaliplatin, pe liniile celulare sensibile si rezistente la acest citostatic
2. Pregatirea studiului de genomica functionala prin microarray si RT-PCR
2.1. Achizitionare de reactivi si aparatura necesari tehnicilor de microarray si RT-PCR

Rezultate obtinute:

Etapa I.
1. In vederea inceperii studiului a avut loc pregatirea teoretica si practica a echipei prin sedinte si mese rotunde de prezentare a grantului, a stadiului actual al cunoasterii in domeniul cancerului colorectal in Romania si a metodelor de studiu care urmeaza a fi folosite in cadrul proiectului. O buna parte a experimentelor urmand sa fie efectuate pe linia celulara de cancer colorectal (Colo320) aflata in dotarea laboratorului, s-au achizitionat materiale specifice necesare cultivarii acesteia: medii de cultura, suplimenti, reactiv pentru testul de viabilitate celulara (MTT-dimethylthiazol tetrazolium bromide) si consumabile de laborator. Totodata, s-a achizitionat un kit de evaluare a ciclului celular, pregatind etapa urmatoare a proiectului.
2. In vederea dezvoltarii unor linii celulare rezistente la Oxaliplatin, am cultivat linia celulara colorectala Colo320, aflata in dotarea laboratorului si am tratat-o cu doze crescande de citostatic, obtinand o linie rezistenta la acest citostatic. Am efectuat testul MTT pentru a studia influenta nivelului dozelor administrate asupra supravietuirii celulare.

Etapa II.
1. S-au evaluat modificarile ciclului celular si apoptoza induse de Oxaliplatin, pe liniile celulare sensibile si rezistente la acest citostatic.
2. In vederea pregatirii studiului de genomica functionala prin microarray si RT-PCR
s-au achizitionat reactivi necesari tehnicilor de microarray si RT-PCR.